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For instance, without an antigen retrieval step, a polyclonal antibody may enhance detection of antigen compared to a monoclonal due to its ability to bind multiple epitopes.

A change in pH or cation concentration of antibody diluent or a simple change in the incubation conditions of primary antibody can also improve antibody affinity for its epitope without the need for a formal antigen retrieval step.

However, antigen retrieval is recommended for most formalin-fixed paraffin-embedded tissues. What is the difference between heat-induced epitope retrieval and proteolytic-induced epitope retrieval?

One of two antigen retrieval methods is recommended on most formalin-fixed paraffin-embedded tissue sections.

Proteolytic-Induced Epitope Retrieval PIER is an enzymatic method of antigen retrieval which relies on enzymes such as proteinase K, trypsin, or pepsin to unmask antigen.

Because ideal retrieval conditions are influenced by the tissue type and fixation method, optimization of the retrieval protocol for each antigen is highly recommended.

Search products for epitope retrieval. Optimization of Antigen Retrieval The identification of optimal conditions for antigen retrieval requires initial testing.

Once optimized, the effects of retrieval can have a significant impact on signal strength and target protein identification. Due to inconsistency in the strength of heating apparatuses employed in HIER protocols, the ideal time, temperature, and pH for each antigen should be optimized to reduce variability.

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3 Kommentare

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